Kanabinoidy produkované rostlinou se nacházejí v kyselé formě. Při působení tepla nebo UV záření ztrácejí tyto kanabinoidy jednu molekulu CO2 a mění se na svou neutrální formu. Tento proces se nazývá dekarboxylace. Při kouření nebo vaporizaci vzorku konopí se tedy velká část kanabinoidů vlivem tepla dekarboxyluje a změní se na svou neutrální formu. Pokud je však tentýž vzorek požit, protože nebylo použito žádné teplo, kyselé kanabinoidy si zachovají svůj původní stav.
Vysokoúčinná kapalinová chromatografie (HPLC) nepoužívá teplo v žádné fázi analýzy, a proto vzorky nejsou dekarboxylovány. Pokud je tedy při práci s HPLC třeba kvantifikovat obsah kanabinoidů, které má jakákoli rostlinná hmota nebo extrakt, lze nabídnout tři různé výsledky koncentrace:
- % Δ9-THC, CBD a CBG.
- % THCA, CBDA a CBGA
- % THCcelkem, CBDcelkem a CBGcelkem.
El THC Total, CBD Total a CBG Total jsou maximální množství, která lze z těchto kanabinoidů získat, pokud je vzorek správně (nebo zcela) dekarboxylován.
Procento THC Total je součet procenta Δ9-THC a procenta THCA vynásobený konverzním faktorem. Vzhledem k tomu, že tento faktor je číslo nižší než 1, není překvapivé, že procento THC Total je nižší než součet Δ9-THC plus THCA, bez ohledu na konverzní faktor.
S vědomím, že dekarboxylační reakce je přeměna THCA na THC ztrátou molekuly oxidu uhličitého (CO2), lze konverzní faktor získat následujícím způsobem:
Když THCA ztratí molekulu CO2, změní se na THC, což je menší molekula, a tudíž méně těžká molekula než THCA (THCA váží 358 gramů na mol, zatímco THC váží 314 gramů na mol). Vzhledem k této ztrátě budeme mít 358/314=0,877 molekul THC na jednu molekulu THCA, a proto je správný způsob výpočtu procenta THC celkem v HPLC následující:
% THC celkem = % THC + (% THCA x 0,877).
Stejný princip se použije pro výpočet procenta CBD Total a CBG Total. Vzorec pro tyto případy je:
% CBD celkem = % CBD + (% CBDA x 0,877).
% CBG celkem = % CBG + (% CBGA x 0,878)
Pokud jsou vzorky analyzovány pomocí plynové chromatografie (GC), není nutné tuto rovnici použít, protože během analýzy jsou vystaveny velmi vysokým teplotám. Proto se předpokládá, že dekarboxylační reakce probíhá výhradně ve vstřikovači.
V úřední metodě "nařízení (ES) č. 1177/2000 ze dne 31. května 2000" je teplota injektoru 300 °C a vstřikované množství je velmi malé. Proto se má za to, že dekarboxylační reakce probíhá v plném rozsahu.
Je třeba vzít v úvahu skutečnost, že dekarboxylace jakéhokoli druhu konopí není obvykle dokonalá. K tomu může dojít buď proto, že se nepodařilo převést všechny kyseliny do neutrálního stavu, protože vznikly jiné produkty z rozkladu, nebo dokonce v důsledku částečného odpaření kanabinoidů. Proto by množství neutrálních kanabinoidů, které se získá, pokud se provede dekarboxylace, mohlo být o něco nižší než získané hodnoty THC Total, CBD Total nebo CBG Total, vzhledem k tomu, že tyto hodnoty vyjadřují maximální množství získané v případě 100% dekarboxylace.
Vzhledem k výše uvedenému můžeme konstatovat, že analýza HPLC bez provedení předchozí dekarboxylace vzorků je nejpřesnější technikou pro zjištění obsahu kanabinoidů v konopí, neboť výsledné hodnoty budou odpovídat skutečným hodnotám vzorku.
Další informace naleznete v článku: Informace o testu kanabinoidů