Els cannabinoides produïts per la planta es troben en forma àcida. Quan s’aplica calor o per acció de la radiació UV, aquests cannabinoides perden una molècula de CO2 i passen a la forma neutra. Aquest procés es denomina descarboxilació. D’aquesta manera, quan es fuma o vaporitza una mostra de cànnabis, gran part dels cannabinoides presents es descarboxilen per l’efecte de la calor i passen a la forma neutra. En canvi, si la mateixa mostra és, per exemple, ingerida, en no aplicar-se calor, els cannabinoides àcids es mantenen en la forma original.
La cromatografia líquida d’alta resolució (HPLC) no fa servir calor en cap fase de l’anàlisi, per la qual cosa no es produeix la descarboxilació de les mostres. Per tant, quan estem treballant en HPLC, si volem quantificar el contingut de cannabinoides d’un material vegetal o extracte, podem oferir tres resultats de concentració:
- % de Δ9-THC, CBD i CBG
- % de THCA, CBDA i CBGA
- % de THC Total, CBD Total i CBG Total
El THC Total, CBD Total i CBG Total és la quantitat màxima que podem obtenir d’aquests cannabinoides si descarboxilem adequadament (o completament) la mostra.
El % de THC Total és la suma de les mesures de % de Δ9-THC i % de THCA multiplicat per un factor de conversió. Com que aquest factor no és un nombre major que 1, no ens ha d’estranyar que el % de THC Total sigui inferior a la suma dels dos anteriors sense considerar aquest factor de conversió.
El càlcul del factor de conversió s’obté, sabent que la reacció de descarboxilació és la transformació de THCA al THC per la pèrdua d’una molècula de diòxid de carboni (CO2), de la manera següent:
En perdre el CO2, el THCA es converteix en THC, que és una molècula més petita i, per tant, menys pesada que el THCA (el THCA pesa 358 grams per mol, mentre que el THC pesa 314 grams per mol). Considerant aquesta pèrdua, per cada molècula de THCA tindrem 358/314= 0,877 molècules de THC. Per tant, la forma correcta de calcular el % de THC Total en HPLC és:
% de THC Total = % de THC + (% de THCA x 0,877)
El mateix principi s’aplica per al càlcul del % de CBD Total i CBG Total. En aquests casos la fórmula és:
% de CBD Total = % de CBD + (% de CBDA x 0,877)
% de CBG Total = % de CBG + (% de CBGA x 0,878)
Quan s’analitzen les mostres utilitzant la cromatografia de gasos (GC), no cal aplicar aquesta equació perquè durant l’anàlisi la mostra està exposada a temperatures molt elevades. Per això, es dóna per fet que la reacció de descarboxilació es produeix totalment en l’injector.
En el mètode oficial del “Reglament (CE) núm. 1177/2000 del 31 de maig de 2000”, l’injector està a 300ºC i la quantitat injectada és molt petita, per la qual cosa es considera que la reacció de descarboxilació es produeix completament.
Cal tenir en compte que la descarboxilació de qualsevol tipus de cànnabis no sol ser perfecta, ja sigui perquè no s’ha aconseguit convertir tots els cannabinoides àcids en neutres, perquè s’han format altres productes de degradació o, fins i tot, per l’evaporació parcial dels cannabinoides, per la qual cosa la quantitat de cannabinoides neutres que obtindrem descarboxilant pot ser lleugerament inferior al valor de THC Total, CBD Total o CBG Total que hem obtingut. Això es deu al fet que aquests valors expressen la quantitat màxima que s’obté en el cas de produir-se una descarboxilació completa al 100%.
Per tot això, podem concloure que l’anàlisi per HPLC, sense descarboxilar la mostra prèviament, és la tècnica més precisa per conèixer el contingut de cannabinoides presents en el cànnabis, ja que els valors que s’obtenen són els valors reals que conté aquesta mostra.
Per a més informació pot visitar: Anàlisi de cannabinoides